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超高速離心機的分離方法

2015-10-21 09:29:455100打(dǎ)印

    1.差速離心:逐次增加離心力(lì),每次可沉降樣品溶液中的一些(xiē)組份。


    差速離心是一種最常(cháng)用的(de)方法。在(zài)這種(zhǒng)方法中,離心管在開始時裝滿了均(jun1)一的樣品溶液。通過在一定速度下一定時間的離心後(hòu),就可得到兩個部份:沉(chén)澱和

上清液。


    通常在第一次離心時把大部分不需要的大粒子沉降去(qù)掉。這時所需的組份大部分仍留在上(shàng)清液中(zhōng)。然後將收(shōu)集到的上清液以更高速度(dù)離心,把所需的粒子沉積

下來。離心的時(shí)間要選擇得(dé)當,使(shǐ)大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。對於得到的沉澱(diàn)和上(shàng)清液(yè)可以進行進一步的離心,直到達到所(suǒ)需要的分離純度為止。



    差速離心的特點(diǎn)是操作(zuò)簡單,但(dàn)分離純度不高。


    2.密(mì)度梯度(dù)離心法:可以同時使(shǐ)樣品中幾個(gè)或全部組份分離,具有很好的分辨率。


    (1)速率區帶法:


    根據樣品中不同粒子所具有的不同的尺寸(cùn)大小及沉降速度(S)。


    大(dà)致步驟如下:


    在離心管中裝入密度(dù)梯度溶液,溶液的密(mì)度從離心管頂部至底部(bù)逐漸(jiàn)增加(正梯度)。


    將所需分離的樣品小心地加至密度梯度溶液(yè)的頂部(bù)。樣品在(zài)梯度溶液表麵形(xíng)成(chéng)一負梯度。


    由於不同大小的粒子在離心力(lì)作用下,在梯度(dù)中移動的速度不一樣(yàng),所以經過(guò)離心後會形成幾條分開(kāi)的樣品區帶。


    樣品粒(lì)子的密度必須大於梯度液注中任一(yī)點(diǎn)的密度。離心過程必須(xū)在區帶到達管子底部前停止。


    (2)等密度離心法:


    根據粒子的不同密度(dù)來分離。離心過程中,粒子(zǐ)會移至與它本身(shēn)密度相同的地方形成區帶。


    密度(dù)樣度的(de)選擇要使梯度的範圍包括所有待(dài)分(fèn)離粒子的密度。樣品可以在密度梯度(dù)液粒上麵或均勻分布在密度梯度中。經離心後,樣品粒子達到它們的平衡點。


    平衡後(hòu)粒子(zǐ)的分離完全(quán)由其密(mì)度決定,與時間無關,此時再改變離心轉速,隻能改變區帶的相對位置。


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